临床检验中痰标本的采集存放和结果解读
冬春季节在我国大部分地区属寒冷季节。由于冷空气可使鼻咽部局部黏膜变得干燥,以致发生细小破裂,病毒、细菌容易趁虚而人,因此,冬春季节历来都是我国各地区呼吸系统疾病的高发季节。及时又准确地做出呼吸道疾病的诊断,检测痰标本是手段之一。相对于已经实现了标准化采集的静脉血标本而言,痰标本因为其采集部位和工具多样、采集要求与采集对象情况各异、标本保存运输难等原因,是标本采集中比较难于操作的一种。本文对痰标本的采集、存放、运输等检验前环节和痰标本的结果解读等检验后内容,做简要介绍。
致病性真菌与条件致病性真菌的区别?主要致病性下呼吸道真菌种类(表)
共识:降钙素原在成人下呼吸道感染性疾病分级管理中的应用(2021)
一、痰标本的分析前阶段的操作
1.痰标本采集的容器:
标本采集容器需为灭菌、有盖的一次性容器;为标本采集方便,容器最好是广口。灭菌容器保证了痰标本后续的细菌/真菌培养的准确性,有盖的要求主要是考虑到痰标本是有潜在致病性标本,采集后应密封运送至实验室。现在国内临床最常用的痰采集盒为灭菌螺旋帽一次性塑料瓶(图1)。
2.痰标本采集前的患者准备:
为除去口腔内杂菌的干扰,要求患者在采集痰标本前,在医生或护士的直接指导下,清洗咽部、刷牙或漱口(建议用3%H2O2及清水漱3次)。同时指导患者咳前深吸气,争取用力咳出呼吸道深部的痰液,并尽量避免混入口腔、鼻咽分泌物。
如果以明确呼吸道感染致病菌为目的,患者最好在使用抗生素前进行痰标本检验,临床意义更大。
3.痰标本的采集:
根据使用目的不同,采集要求不同。
(1)用于培养鉴定:以患者早晨醒来咳出的第一口深痰为最好,因为清晨第一口痰在呼吸道停留时间久,检测出致病菌的可能性更大。其他时间段的痰也可使用。细菌培养要求痰量>1 ml,真菌培养要求痰量3~5 ml。
(2)用于细胞学检查:用上午9:00—10:00点深咳的痰液并及时送检,应尽量含带血的病理性痰液。该类检查不可使用清晨第一口痰,因为在呼吸道停留过久的痰标本中细胞发生变性,结构不清,不利于痰的细胞学检查。
(3)浓缩法找抗酸杆菌:应留24 h痰(>5 ml)。
(4)特殊情况下的痰采集:对于痰少患者,可诱导性采集痰标本。在医生或护士的直接指导下,要求患者刷牙或用水漱口,使患者保持头和肩底于胸部水平的姿势10 min,或雾化吸入加热的10%甘油或15%氯化钠溶液,诱导痰液咳出。幼儿痰液收集困难时,可用消毒棉拭子刺激喉部引起咳嗽反射,用棉拭子采集标本。痰标本难以获得或检测目标物特殊(如甲型流感病毒等)时,可通过采集咽部拭子方式获得标本,采集部位见图2、图3。
4.痰标本的运送和保存:
痰标本获取后应立即送检。具体要求为:从标本采集完成至送至检验科,总共时间应≤2 h,运送条件为常温,不可冷藏运送及保存。如送至检验科的痰标本已采集超过2 h,标本中白细胞及一些菌体会溶解,杂菌过度生长,干扰结果判断。
二、痰标本检验的结果解读
痰标本最常见的临床检验项目包括:痰涂片及染色、痰培养+微生物鉴定(细菌/真菌)、药敏实验(细菌/真菌)、浓缩查结核杆菌。每类检测的"检测周转时间"(从医生申请检验项目到收到检验报告的时间)不同、观察内容不同,因此临床应用也大有不同。国内医院实验室一般情况如下。
1.痰涂片及染色:
(1)检测周转时间:约1~2 d。
(2)检测目的:通过镜检中观察到的细菌形态、革兰染色性质、炎症细胞等,初步推测患者是某类菌感染,为医师提供用药粗略方向。
此外,痰涂片的另一项重要作用在于通过显微镜观察痰中细胞数量,以判断痰标本是否合格,确定该标本是否可用于后续的痰培养。当标本中鳞状上皮细胞过多、白细胞数目少时,说明痰标本可能来自于上呼吸道,进行细菌培养价值不大,应重新留取标本。
2.痰培养和微生物鉴定:
(1)检测周转时间:约3~7 d。
(2)检测目的:明确致病菌种类,为临床病情诊断及用药提供依据。正常人上呼吸道定植有大量的正常菌群,而气管、支气管和肺泡等下呼吸道通常无菌。美国《临床微生物学操作规程(CMPH)》2007版(3.11.2.9)中提到口咽部正常微生物菌群包括草绿色链球菌、普通定植的奈瑟菌属、脑膜炎奈瑟菌、假白喉棒杆菌、血浆凝固酶阴性葡萄球菌、罗氏菌属、F群链球菌、厌氧菌、嗜血杆菌属(不包括流感嗜血杆菌)、肠球菌属、假丝酵母菌属、艾肯菌属、放线杆菌属、二氧化碳嗜纤维菌属、莫拉菌属。当分离培养为正常菌群时,最终检验结果报告为"正常菌群生长"。
3.痰标本的药物敏感试验:
(1)检测周转时间:在已经获得分纯菌落的基础上,进行药敏实验约2~3 d。
(2)检测目的:帮助医生正确选择抗生素、监测细菌耐药性变化、调整抗生素经验治疗方案。
药敏实验结果有"S""R""I"3种情况。"S"表示敏感,指由被测细菌引起的感染,可用该抗菌药常用推荐剂量达到治疗目的;"R"表示耐药,指被测菌不能被该抗生素的常用剂量抑制;"I"表示"中间",指药物需提高剂量或在生理性浓集的地方才能发挥临床效力。
药敏结果根据不同菌种、不同试验抗生素,结果解读方式各异。具体如下:
4.浓缩查结核杆菌:
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